· pollaacrylamideDivê Gel ji hêla Acrylamide Monomer, Polymerization destpêkirina materyalê, katalîzator, û rastê tevliheviya xwê û buffer bi hev re.
· Acrylamideû bis (n, n '- methylene double acrylamide) Matrix forma Monomer e.
· Ammonium Persulfate Pêvajoya Pêvekirî ya Adhesive dest pê dike. Formulasyona glue hewce dike ku 10% amonium çareseriya kesên ku di nav avê de hatî amadekirin. Piraniya agahdarî hewcedarî ji bo karanîna çalak destnîşan kir. Lêbelê, çareseriya 10% dikare ji bo 4 hefte bêyî windakirina girîng a çalakiyê were danîn. Gava ku glue ji hev veqetîne heya 10 ml û ji 10 ML-ê dûr bixe.
TIP: Ji sedîAcrylamideDi sequencing glue û glue protein ne yek in. Ger karanîna acrylamide ya premade: çareseriya Bis, piştrast bike ku şûşeya rast bistîne.
· Temed (n, n, n ', n' - tetramethyl etylediamine) katalîzator e, di şûşeyek qehweyî de, di sarincokê de tê danîn. Berî ku hûn glue zêde bikin tenê zêde bikin.
· Electrophoresiya Polyacrylamide di elektrophoresis de li ser û piştî her carê divê were şûştin. Piştî electrophoresis, bi şûşek nermik û kincê nermî di ava sar de bişon, bi ava distilandî bişon û bisekinin.
· Zû û toz dikare bi polimeriya kole re bibe sedema. Berî electrophoresis, plakaya pîvanê bi paqijker paqij bikin û ew bi rengek nermîn paqij bikin. Bi ava distilandî rûnin û bi pêlavek bi tevahî paqij bikin. Berî ku hûn bi kaxezê ve paqij bikin û zûtir paqij bikin û zûtir rûnin, bi 70% etanol re rijandin. Nimûneyên acrylamide bi serfirazî zêde bikin: bis, av, çareseriya buffer, ammonium Persulfate, ceribandin. Baş şiyar bikin û tavilê bişon.
Ew ne hewce ye ku Polyacrylamide berî polymerization. (Acrylamide di valahiyek de tête bikar anîn da ku bubbles ji ber ku oksîjenê polîmerizasyonê asteng dike.)
Serişteyên nimûneya glue horizontal.
· Dabeşek kaxezê reş li qutiya jêrîn, paşîn reş bikin da ku hin holika nimûneyê çêbikin da ku bêtir eşkere bibînin.
· Tankê glue buffer tije, tenê li ser koloid.
· Heke ku peravê ronahiyek heye, ronahiyê bizivirînin, bila ronahî li koloid ronî bike. Nimûneyê li pipette bikişînin.
· Vebijêrin ku amûreya pipetting otomatîk.
· Di nav 10-200 MU 1 de xala tevgera liquidê dikare di piraniya xalên li ser nimûneyê de were bikar anîn. Ji bo nimûneyên pir piçûk (kêmtir ji 10μ1), serê pipette ya dirêj ku ji bo glue sequencing bêtir hêsantir e.
· Pipetting tenê di nimûneyê de nemir, ku hêdî hêdî diherike. Dibe ku nimûneyê bi glycerin re çikil xuya bibe, û pompeya lezgîn dibe ku pêlên hewayê bikişînin nav serê pipette.
· Nimûneyên piştî ku hûn serê xwe bişewitînin, dê serê xwe bi nermî bi nermî li tenişta pîvaz an kaxezê paqijkirinê bişewitînin. Hişyar bimînin ku nimûneyê nekişînin.
Nimûneyê li holika nimûneyê bicîh bikin
· Amûrek pipetting da ku zextek piçûktir bigire, nimûneyan hinekî piçûktir bike serê xwe biqelîne.
· Serê Pipetting di nav buffer de, hinekî bilindtir ji holên spotê, zexta erênî biparêze. Tîpa pipette dikare di nav holek piçûk de were danîn.
· Hêdî û bi domdarî nimûneyên derve. Tipê pipette li jor nimûneya nimûneyê tê danîn, û nimûn dê di nav holikê de rûne. Bila nimûneya nimûneyê da ku li şûna ku bixe nava nimûneyê dagirtin.
· Carekê dara paşîn a nimûneyê bi serê rûnî, liquid dê berbi lingê duyemîn ve biçin, hêdî hêdî tevgera liquid bilind bikin, ji buffer derkevin
Meriv çawa nimûneya glue ya vertical dike?
· Nimûneyên nimûneya glue Vertical di navbera du perçeyên pîvanê de hatine damezirandin. Di zincîra pir nerm de, serê pipette jî nekare di navbera du plakayên xalî de were danîn. Glycerin temaşe bikin! Serê Pipette li ser holika nimûneyê bixin û nimûneyê dê di nav holikê de rûne.
· Berî nimûneya point, dê piştrast bin ku xala vertikal a polypropylene acyl hole nimûneya nimûneyê paqij bike. Acrylamide ya bêpergal û ava ku dibe ku di binê holika nimûneyê de xuya bibe bişo. Av dikare holika nimûneyê bi rengek piçûktir bike. Syringek 25ml an 50ml an 50-ê bikar bînin. Di bufferis elektrophoresis de hilînin û bi baldarî holika nimûneyê bişon.
· Ew dikare zehmet e ku meriv nimûneya nimûneyê bibîne, lê di heman demê de, yên mayî hêsan e. Ger hebên zêde hene, nimûneya nimûneyê bi Bromophenol şîn re tê ceribandin.
Demjimêra paşîn: Mar-31-2023