· polyacrylamidegel divê ji hêla monomera acrylamide, maddeya destpêkê ya polîmerîzasyonê, katalîzator, û mafê xwê û tevliheviya tamponê bi hev re pêk bîne.
· acrylamideû BIS (N, N'- methylene du acrylamide) matrixa gêlê ya monomer e.
· Amonyum persulfate pêvajoya polîmerkirina adhesive dest pê dike.Formulasyona çîtikê hewce dike ku %10 çareseriya amonyum persulfatê ku di nav avê de hatî amadekirin.Piraniya agahdarî hewcedariya karanîna çalak nîşan didin.Lêbelê, çareseriya 10% dikare çend hefte bêyî windabûna girîng a çalakiyê li 4 ℃ were danîn.Heya 10 ml çêkin û dema ku benîşt negihêje hev, bavêjin.
Tip: Rêjeya jiacrylamidedi rêzgirtinê de benîşt û proteîn ne yek e.Ger acrylamide-a premade bikar bînin: çareseriya BIS, pê ewle bin ku şûşeya rast bistînin.
· TEMED (N, N, N ', N '- tetramethyl ethylenediamine) katalîzatorek e, di şûşeyek qehweyî de, di sarincê de tê danîn.Hema berî rijandina benîştê lê zêde bikin.
· Elektroforeza polyacrylamide cama ku di elektroforezê de tê bikar anîn divê berî her carê û piştî wê were şûştin.Piştî elektroforezê, bi firçeyek nerm û qumaşê di ava sabûn a germ de bişon, bi ava serjêkirî bişon û bisekine ku hişk bibe.
· şil û toz dikare bibe sedema polîmera vala.Beriya elektroforezê, plakaya camê bi paqijkerê camê paqij bikin û bi firçeyek nerm paqij bikin.Bi ava serjêkirî bişon û bi kaxizekî baş hişk bike.Şuştina bi 70% etanolê berî paqijkirina bi kaxezê re dibe alîkar ku zuwabûn were paqijkirin û bilezkirin.Nimûneyên acrylamide li pey hev zêde bikin: BIS, av, çareseriya tampon, ammonium persulfate, TEMED.Baş bihejînin û yekser birijînin.
Ne hewce ye ku berî polîmerîzasyonê polîakrîlamîd bê gazkirin.(Acrylamide berê di valahiyekê de dihat danîn da ku bilbilan rakin ji ber ku oksîjen polîmerîzasyonê asteng dike.)
Serişteyên nimûneya xala benîştê ya Horizontal.
· Parçeyek kaxezek reş têxe qutiya jêrîn, paşxaneya reş da ku hin qulika nimûneyê çêbike da ku zelaltir were dîtin.
· Tampon tampon dagirtî, hema li ser koloidê.
· Ger ronahiyek li kêlekê hebe, çirayan vekin, bila ronahiyê koloid bibiriqe.Nimûneyê bikişînin nav pipetê.
· bikaranîna amûra pipekirina otomatîkî.
· Di 10-200 mu de 1 xala tevgerê ya şil dikare di piraniya xalên li ser nimûneyê de were bikar anîn.Ji bo kunên nimûneyên pir piçûk (kêmtir ji 10μ1), serê pîpeta dirêj a ku ji bo rêzkirina çîçek tê bikar anîn hêsantir e.
· pîpîtkirin ku tenê di nimûneyê de tê nixumandin, şilava ku hêdî hêdî diherike nefeh dike.Nimûne dibe ku bi glycerin re asê xuya bibe, û pompkirina bilez dibe ku bilbilên hewayê bikişîne nav serê pipetê.
· Nimûneyên piştî nefehmkirina serê pîpîtê, dê serê şilavê bi nermî li ser keviya boriyê bihejînin an kaxezê paqij bikin serê şilê li derveyî dilopan dimijin.Hişyar bin ku nimûneyê nemijînin.
Nimûneyê bixin nav qulika nimûneyê
· Amûra pipetkirinê ji bo ku piçek zextê bihêle, mînakan hinekî serê şilavê biherike.
· Serê pîpîtê ku têxe nav tamponê, hinekî ji kunên deqê bilindtir e, zexta erênî diparêze.Serê pîpettê dikare bikeve qulikek piçûk.
· Hêdî hêdî û bi rêkûpêk nimûne derdikevin.Tîpa pipetê li jorê qulika nimûneya xalê tê danîn, û nimûne dê di qulikê de biçe.Bihêlin ku nimûne bişewitîne da ku li şûna ku hûn têxin hundurê qulika nimûneyê tije bikin.
· Carekê dilopa dawîn a nimûneya bi serê şil de, şil dê berbi lingê duyemîn ve biçe, hêdî hêdî tevgera şilê bilind bike, ji tamponê derkeve
Meriv çawa nimûneya benîştê ya vertîkal dike?
· Kulên nimûneyê yên xalîçeya vertîkal di navbera du perçeyên camê de çêdibin.Di benîştê pir zirav de, serê pîpetê jî nikare bikeve navbera du lewheyên cam.Li glycerin temaşe bikin!Serê pîpetê deynin ser qulika nimûneyê û nimûne dê di qulikê de biçe.
· Nimûneya nuqteyê berê, pê ewle bin ku xala vertîkal a polîpropîlen acil gêlê kuna nimûneyê paqij tê şûştin.Akrylamîda nepolîmerkirî û ava ku dibe ku li binê qulika nimûneyê xuya bibe bişon.Av dikare qulika nimûneyê pir piçûktir bike.Sirincek 25 ml an 50 ml û derziyek 18-gauge bikar bînin.Di tampona elektroforezê de birijînin û bi baldarî qulika nimûneyê bişon.
· Dîtina qulika nimûneyê dijwar dibe, lê di heman demê de, ya mayî hêsan e.Ger kunên zêde hebin, tampona nimûneyê dikare bi bromfenol şîn were ceribandin.
Dema şandinê: Mar-31-2023